Šis tyrimas parodo, kad su šaknimis susijęs grybelis Kosakonia oryziphila NP19, išskirtas iš ryžių šaknų, yra perspektyvus augalų augimą skatinantis biopesticidas ir biocheminis agentas ryžių blaškymuisi kontroliuoti. In vitro eksperimentai buvo atlikti su šviežiais Khao Dawk Mali 105 (KDML105) aromatinių ryžių daigų lapais. Rezultatai parodė, kad NP19 veiksmingai slopino ryžių blaškymą sukeliančių grybelinių konidijų dygimą. Grybelinė infekcija buvo slopinama trimis skirtingomis apdorojimo sąlygomis: ryžių inokuliavimas NP19 ir grybelinėmis konidijomis; vienalaikis lapų inokuliavimas NP19 ir grybelinėmis konidijomis; ir lapų inokuliavimas grybinėmis konidijomis, po kurio 30 val. buvo atliktas apdorojimas NP19. Be to, NP19 sumažino grybelio hifų augimą 9,9–53,4 %. Vazonėlių eksperimentuose NP19 padidino peroksidazės (POD) ir superoksido dismutazės (SOD) aktyvumą atitinkamai 6,1–63,0 % ir 3,0–67,7 %, o tai rodo sustiprintus augalų apsaugos mechanizmus. Palyginti su neužkrėstais NP19 kontroliniais augalais, NP19 užkrėstuose ryžių augaluose pigmento kiekis padidėjo 0,3–24,7 %, pilnų grūdų skaičius vienoje kryželėje – 4,1 %, pilnų grūdų derlius – 26,3 %, derliaus masės indeksas – 34,4 %, o aromatinio junginio 2-acetil-1-pirolino (2AP) kiekis – 10,1 %. Ryžių augaluose, užkrėstuose ir NP19, ir blaustiniu grybeliu, padidėjimas buvo atitinkamai 0,2–49,2 %, 4,6 %, 9,1 %, 54,4 % ir 7,5 %. Lauko eksperimentai parodė, kad NP19 kolonizuotuose ir (arba) inokuliuotuose ryžių augaluose pilnų grūdų skaičius vienoje kryželėje padidėjo 15,1–27,2 %, pilnų grūdų derlius – 103,6–119,8 %, o 2AP kiekis – 18,0–35,8 %. Šie ryžių augalai taip pat pasižymėjo didesniu SOD aktyvumu (6,9–29,5 %), palyginti su blastiniu grybeliu užkrėstais ryžių augalais, kurie nebuvo inokuliuoti NP19. NP19 panaudojimas ant lapų po infekcijos sulėtino pažeidimo progresavimą. Taigi, įrodyta, kad K. oryziphila NP19 yra potencialus augalų augimą skatinantis bioagentas ir biopesticidas, skirtas ryžių blastiniam grybeliui kontroliuoti.
Tačiau fungicidų veiksmingumui įtakos turi daug veiksnių, įskaitant formulę, naudojimo laiką ir būdą, ligos sunkumą, ligų prognozavimo sistemų veiksmingumą ir fungicidams atsparių padermių atsiradimą. Be to, cheminių fungicidų naudojimas gali sukelti liekamąjį toksiškumą aplinkoje ir kelti pavojų naudotojų sveikatai.
Vazonėlių eksperimente ryžių sėklos buvo sterilizuotos paviršiuje ir daigintos, kaip aprašyta aukščiau. Tada jos buvo pasėtos K. oryziphila NP19 ir persodintos į daigų padėklus. Daigai buvo inkubuojami 30 dienų, kad išdygtų ryžių daigai. Tada daigai buvo persodinti į vazonėlius. Persodinimo metu ryžių augalai buvo tręšiami, siekiant paruošti juos infekcijai grybeliu, sukeliančiu ryžių blaškymąsi, ir ištirti jų atsparumą.
Lauko eksperimente sudygusios Aspergillus oryzae NP19 užkrėstos sėklos buvo apdorotos aukščiau aprašytu metodu ir suskirstytos į dvi grupes: Aspergillus oryzae NP19 užkrėstos sėklos (RS) ir neužkrėstos sėklos (US). Sudygusios sėklos buvo pasodintos į padėklus su sterilizuotu dirvožemiu (dirvožemio, degintų ryžių lukštų ir mėšlo mišiniu santykiu 7:2:1 pagal svorį) ir inkubuotos 30 dienų.
Į R ryžius buvo įpilta „K. oryziphila“ konidijų suspensijos ir po 30 val. inkubacijos toje pačioje vietoje buvo įpilta 2 μl „K. oryziphila NP19“. Visos Petri lėkštelės buvo inkubuojamos 25 °C temperatūroje tamsoje 30 valandų, o po to inkubuojamos nuolatiniame apšvietime. Kiekviena grupė buvo pakartota tris kartus. Po 72 valandų inkubacijos augalų pjūviai buvo ištirti ir atlikti skenuojančios elektroninės mikroskopijos tyrimai. Trumpai tariant, augalų pjūviai buvo fiksuoti fosfatiniu buferiniu tirpalu, kuriame yra 2,5 % (v/v) glutaraldehido, ir dehidratuoti etanolio tirpalų serijoje. Mėginiai buvo džiovinami iki kritinio taško anglies dioksidu, po to padengti auksu ir 15 minučių stebimi skenuojančiu elektroniniu mikroskopu.
Įrašo laikas: 2025 m. spalio 13 d.