Visceralinė leišmaniozė (VL), Indijos subkontinente vadinama kala-azar, yra parazitinė liga, kurią sukelia pirmuonis Leishmania. Ji gali būti mirtina, jei nebus laiku gydoma. Pietryčių Azijoje smėlinė musė Phlebotomus argentipes yra vienintelis patvirtintas VL pernešėjas, kur ji kontroliuojama purškiant liekanomis patalpose (IRS) – sintetiniu insekticidu. DDT naudojimas VL kontrolės programose lėmė smėlinių musių atsparumo išsivystymą, todėl DDT buvo pakeistas insekticidu alfa-cipermetrinu. Tačiau alfa-cipermetrinas veikia panašiai kaip DDT, todėl smėlinių musių atsparumo rizika padidėja esant stresui, kurį sukelia pakartotinis šio insekticido poveikis. Šiame tyrime įvertinome laukinių uodų ir jų F1 palikuonių jautrumą, naudodami CDC buteliukų biologinį tyrimą.
Uodų pėdsakų surinkome 10 kaimų Muzafarpuro rajone, Biharo valstijoje, Indijoje. Aštuoniuose kaimuose toliau buvo naudojami didelio stiprumo preparatai.cipermetrinasVienas kaimas nustojo naudoti didelės koncentracijos cipermetriną purškimui patalpose, o vienas kaimas niekada nenaudojo didelės koncentracijos cipermetrino purškimui patalpose. Surinkti uodai buvo veikiami iš anksto nustatyta diagnostine doze nustatytą laiką (3 μg/ml 40 min.), o numalšinimo rodiklis ir mirtingumas buvo registruojami praėjus 24 valandoms po poveikio.
Laukinių uodų žūties rodikliai svyravo nuo 91,19 % iki 99,47 %, o jų F1 kartų – nuo 91,70 % iki 98,89 %. Praėjus dvidešimt keturioms valandoms po užkrėtimo, laukinių uodų mirtingumas svyravo nuo 89,34 % iki 98,93 %, o jų F1 kartos – nuo 90,16 % iki 98,33 %.
Šio tyrimo rezultatai rodo, kad P. argentipes gali išsivystyti atsparumas, todėl, pasiekus išnaikinimo lygį, reikia nuolat stebėti ir būti budriems, kad būtų išlaikyta kontrolė.
Visceralinė leišmaniozė (VL), Indijos subkontinente vadinama kala-azar, yra parazitinė liga, kurią sukelia pirmuonis Leishmania ir kuri perduodama per užkrėstų smėlinių musių (Diptera: Myrmecophaga) patelių įkandimus. Smėlinės musės yra vienintelis patvirtintas VL pernešėjas Pietryčių Azijoje. Indija yra arti tikslo – išnaikinti VL. Tačiau norint išlaikyti mažą sergamumą po išnaikinimo, labai svarbu sumažinti pernešėjų populiaciją, kad būtų išvengta galimo perdavimo.
Pietryčių Azijoje uodų kontrolė vykdoma purškiant uodų liekanas patalpose (IRS) naudojant sintetinius insekticidus. Dėl slapto sidabrakojų poilsio elgesio jie yra tinkamas insekticidų kontrolės taikinys purškiant uodų liekanas patalpose [1]. Dichlorodifeniltrichloroetano (DDT) uodų liekanų purškimas patalpose pagal Indijos nacionalinę maliarijos kontrolės programą turėjo didelį šalutinį poveikį kontroliuojant uodų populiacijas ir žymiai sumažinant virusinių infekcijų (VL) atvejus [2]. Ši neplanuota VL kontrolė paskatino Indijos VL likvidavimo programą pritaikyti uodų liekanų purškimą patalpose kaip pagrindinį sidabrakojų kontrolės metodą. 2005 m. Indijos, Bangladešo ir Nepalo vyriausybės pasirašė susitarimo memorandumą, kurio tikslas – iki 2015 m. išnaikinti VL [3]. Likvidavimo pastangos, apimančios vektorių kontrolę ir greitą žmonių atvejų diagnozavimą bei gydymą, buvo skirtos iki 2015 m. pereiti į konsolidavimo etapą, o šis tikslas vėliau buvo peržiūrėtas iki 2017 m., o vėliau – iki 2020 m. [4]. Naujajame pasauliniame užleistų tropinių ligų likvidavimo plane numatytas VL likvidavimas iki 2030 m. [5]
Indijai pradedant BCVD posteradicacinę fazę, būtina užtikrinti, kad neišsivystytų reikšmingas atsparumas beta-cipermetrinui. Atsparumo priežastis yra ta, kad tiek DDT, tiek cipermetrinas veikia tuo pačiu būdu, būtent, jie veikia VGSC baltymą [21]. Taigi, atsparumo išsivystymo riziką smėlinėms musėms gali padidinti stresas, kurį sukelia reguliarus labai stipraus cipermetrino poveikis. Todėl būtina stebėti ir nustatyti galimas smėlinių musių populiacijas, atsparias šiam insekticidui. Atsižvelgiant į tai, šio tyrimo tikslas buvo stebėti laukinių smėlinių musių jautrumo būklę, naudojant Chaubey ir kt. [20] nustatytas diagnostines dozes ir poveikio trukmę, tyrinėjant P. argentipes skirtinguose Biharo (Indija) Muzaffarpur rajono kaimuose, kuriuose nuolat buvo naudojamos cipermetrinu apdorojamos patalpų purškimo sistemos (nuolatinės IPS kaimai). Laukinių P. argentipes jautrumo statusas iš kaimų, kurie nustojo naudoti cipermetrinu apdorotas patalpų purškimo sistemas (buvę IPS kaimai), ir tų, kurie niekada nenaudojo cipermetrinu apdorotų patalpų purškimo sistemų (ne IPS kaimai), buvo palygintas naudojant CDC butelių biologinį tyrimą.
Tyrimui buvo atrinkta dešimt kaimų (1 pav.; 1 lentelė), iš kurių aštuoniuose buvo nuolatinis sintetinių piretroidų (hipermetrino; kaimai, žymimi kaip nuolatinio hipermetrino purškimo) naudojimas patalpose ir per pastaruosius 3 metus buvo užregistruota virusinės infekcijos (VL) atvejų (bent vienas atvejis). Iš likusių dviejų tyrime dalyvavusių kaimų vienas kaimas, kuriame nebuvo taikomas beta-cipermetrino purškimas patalpose (kaimas, kuriame purškimas patalpose nebuvo taikomas), buvo pasirinktas kaip kontrolinis kaimas, o kitas kaimas, kuriame beta-cipermetrinas buvo purškiamas patalpose su pertraukomis (kaimas, kuriame purškiama patalpose su pertraukomis / buvęs kaimas, kuriame purškiama patalpose), buvo taikomas kontrolinis kaimas. Šių kaimų atranka buvo pagrįsta koordinavimu su Sveikatos departamentu ir Patalpų purškimo komanda bei Muzafarpuro rajono Patalpų purškimo mikro veiksmų plano patvirtinimu.
Muzafarpuro rajono geografinis žemėlapis, kuriame nurodytos tyrime įtrauktų kaimų vietos (1–10). Tyrimo vietos: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Žemėlapis buvo parengtas naudojant QGIS programinę įrangą (3.30.3 versija) ir „Open Assessment Shapefile“.
Buteliai ekspozicijos eksperimentams buvo paruošti pagal Chaubey ir kt. [20] ir Denlinger ir kt. [22] metodus. Trumpai tariant, 500 ml stikliniai buteliai buvo paruošti likus dienai iki eksperimento, o vidinės butelių sienelės buvo padengtos nurodytu insekticidu (diagnostinė α-cipermetrino dozė buvo 3 μg/ml), užtepant insekticido acetono tirpalu (2,0 ml) ant butelių dugno, sienelių ir dangtelio. Kiekvienas butelis buvo džiovinamas mechaniniu voleliu 30 min. Per šį laiką lėtai atsukite dangtelį, kad acetonas išgaruotų. Po 30 min. džiovinimo nuimkite dangtelį ir sukite butelį, kol visas acetonas išgaruos. Tada buteliai buvo palikti atidaryti džiūti per naktį. Kiekvienam pakartotiniam bandymui vienas butelis, naudojamas kaip kontrolinis, buvo padengtas 2,0 ml acetono. Visi buteliai buvo pakartotinai naudojami viso eksperimento metu, tinkamai išvalius pagal Denlinger ir kt. bei Pasaulio sveikatos organizacijos aprašytą procedūrą [22, 23].
Kitą dieną po insekticido paruošimo iš narvų buvo išimti 30–40 laukinėje gamtoje sugautų uodų (badaujančių patelių) ir švelniai įpūsta į kiekvieną buteliuką. Kiekvienam insekticidu padengtam buteliukui, įskaitant kontrolinį, buvo panaudota maždaug tiek pat musių. Tai pakartokite bent penkis–šešis kartus kiekviename kaime. Po 40 minučių poveikio insekticidu buvo užregistruotas numuštų musių skaičius. Visos musės buvo sugautos mechaniniu aspiratoriumi, sudėtos į pintos dydžio kartoninius indelius, uždengtus smulkiu tinkleliu, ir patalpintos į atskirą inkubatorių tokiomis pačiomis drėgmės ir temperatūros sąlygomis su tuo pačiu maisto šaltiniu (vatos kamuoliukais, suvilgytais 30 % cukraus tirpale) kaip ir neapdorotos kolonijos. Mirtingumas buvo užregistruotas praėjus 24 valandoms po poveikio insekticidu. Visi uodai buvo išpreparuoti ir ištirti, siekiant patvirtinti rūšies tapatybę. Ta pati procedūra buvo atlikta su F1 palikuonimis. Numušimo ir mirtingumo rodikliai buvo užregistruoti praėjus 24 valandoms po poveikio. Jei mirtingumas kontroliniuose buteliukuose buvo < 5 %, pakartojimuose mirtingumo korekcija nebuvo atlikta. Jei mirtingumas kontroliniame butelyje buvo ≥ 5 % ir ≤ 20 %, mirtingumas to pakartotinio bandinio bandymo buteliukuose buvo koreguotas pagal Abbotto formulę. Jei mirtingumas kontrolinėje grupėje viršijo 20 %, visa bandymo grupė buvo atmesta [24, 25, 26].
Laukinėje gamtoje sugautų P. argentipes uodų vidutinis mirtingumas. Paklaidų juostos rodo vidurkio standartines paklaidas. Dviejų raudonų horizontalių linijų susikirtimas su grafiku (atitinkamai 90 % ir 98 % mirtingumas) rodo mirtingumo langą, kuriame gali išsivystyti atsparumas.[25]
Laukinėje gamtoje sugautų P. argentipes F1 palikuonių vidutinis mirtingumas. Paklaidų juostos rodo vidurkio standartines paklaidas. Kreivės, kurias kerta dvi raudonos horizontalios linijos (atitinkamai 90 % ir 98 % mirtingumas), rodo mirtingumo diapazoną, kuriame gali išsivystyti atsparumas [25].
Kontrolinio/ne IRS kaimelio (Manifulkaha) uodai buvo labai jautrūs insekticidams. Vidutinis laukinėje gamtoje sugautų uodų mirtingumas (±SE) praėjus 24 val. po numušimo ir ekspozicijos buvo atitinkamai 99,47 ± 0,52 % ir 98,93 ± 0,65 %, o vidutinis F1 palikuonių mirtingumas buvo atitinkamai 98,89 ± 1,11 % ir 98,33 ± 1,11 % (2 ir 3 lentelės).
Šio tyrimo rezultatai rodo, kad sidabrakojės smėlinės musės gali išsiugdyti atsparumą sintetiniam piretroidiniam (SP) α-cipermetrinui kaimuose, kuriuose piretroidinis (SP) α-cipermetrinas buvo naudojamas reguliariai. Priešingai, sidabrakojės smėlinės musės, surinktos iš kaimų, kuriems netaikoma IRS/kontrolės programa, pasirodė esančios labai jautrios. Laukinių smėlinių musių populiacijų jautrumo stebėjimas yra svarbus norint stebėti naudojamų insekticidų veiksmingumą, nes ši informacija gali padėti valdyti atsparumą insekticidams. Dėl istorinio IRS, naudojančios šį insekticidą, atrankos spaudimo [1] reguliariai pranešama apie didelį smėlinių musių atsparumą DDT [1].
Nustatėme, kad P. argentipes yra labai jautrios piretroidams, o lauko bandymai Indijoje, Bangladeše ir Nepale parodė, kad IRS pasižymi dideliu entomologiniu veiksmingumu, kai naudojamas kartu su cipermetrinu arba deltametrinu [19, 26, 27, 28, 29]. Neseniai Roy ir kt. [18] pranešė, kad P. argentipes Nepale įgijo atsparumą piretroidams. Mūsų lauko jautrumo tyrimas parodė, kad sidabrakojės smėlinės musės, surinktos iš kaimų, kuriuose IRS nebuvo paveikta, buvo labai jautrios, tačiau musės, surinktos iš kaimų, kuriuose IRS buvo protarpiais/buvęs ir nuolat (mirtingumas svyravo nuo 90 % iki 97 %, išskyrus smėlines muses iš Anandpur-Haruni, kurių mirtingumas per 24 val. po poveikio siekė 89,34 %), greičiausiai buvo atsparios labai veiksmingam cipermetrinui [25]. Viena iš galimų šio atsparumo išsivystymo priežasčių yra spaudimas, kurį daro įprastinis purškimas patalpose (IRS) ir vietinio purškimo programos, kurios yra standartinės procedūros kala-azar protrūkiams valdyti endeminėse vietovėse / kvartaluose / kaimuose (Standartinė protrūkių tyrimo ir valdymo veiklos procedūra [30]. Šio tyrimo rezultatai rodo ankstyvus selektyvaus spaudimo, nukreipto prieš labai veiksmingą cipermetriną, požymius. Deja, istoriniai jautrumo duomenys šiam regionui, gauti naudojant CDC buteliukų biologinį tyrimą, nėra prieinami palyginimui; visuose ankstesniuose tyrimuose P. argentipes jautrumas buvo stebimas naudojant PSO insekticidais impregnuotą popierių. Diagnostinės insekticidų dozės PSO bandymo juostelėse yra rekomenduojamos insekticidų, skirtų naudoti prieš maliarijos pernešėjus (Anopheles gambiae), identifikavimo koncentracijos, o šių koncentracijų praktinis pritaikomumas smėlinėms musėms nėra aiškus, nes smėlinės musės skraido rečiau nei uodai ir daugiau laiko praleidžia sąlytyje su substratu biologiniame tyrime [23].
Sintetiniai piretroidai Nepalo viruso paveiktose endeminėse vietovėse naudojami nuo 1992 m., kaitaliojant juos su SP alfa-cipermetrinu ir lambda-cihalotrinu smėlinėms musėms kontroliuoti [31], o deltametrinas taip pat naudojamas Bangladeše nuo 2012 m. [32]. Fenotipinis atsparumas buvo nustatytas laukinėse sidabrakojų smėlinių musių populiacijose tose vietovėse, kur sintetiniai piretroidai buvo naudojami ilgą laiką [18, 33, 34]. Laukinėse Indijos smėlinių musių populiacijose buvo nustatyta nesinomininė mutacija (L1014F), kuri buvo siejama su atsparumu DDT, o tai rodo, kad atsparumas piretroidams atsiranda molekuliniu lygmeniu, nes ir DDT, ir piretroidas (alfa-cipermetrinas) veikia tą patį geną vabzdžių nervų sistemoje [17, 34]. Todėl sistemingas cipermetrino jautrumo vertinimas ir uodų atsparumo stebėjimas yra būtini likvidavimo ir po likvidavimo laikotarpiais.
Galimas šio tyrimo apribojimas yra tas, kad jautrumui matuoti naudojome CDC mėgintuvėlio biologinį tyrimą, tačiau visuose palyginimuose buvo naudojami ankstesnių tyrimų, atliktų naudojant PSO biologinio tyrimo rinkinį, rezultatai. Dviejų biologinių tyrimų rezultatai gali būti tiesiogiai nepalyginami, nes CDC mėgintuvėlio biologinis tyrimas matuoja viruso aktyvumo sumažėjimą diagnostinio laikotarpio pabaigoje, o PSO rinkinio biologinis tyrimas matuoja mirtingumą praėjus 24 arba 72 valandoms po sąlyčio (pastarasis – lėtai veikiantiems junginiams) [35]. Kitas galimas apribojimas yra IRS kaimų skaičius šiame tyrime, palyginti su vienu ne IRS ir vienu ne IRS / buvusiu IRS kaimu. Negalime daryti prielaidos, kad uodų vektorių jautrumo lygis, pastebėtas atskiruose vieno rajono kaimuose, atspindi jautrumo lygį kituose Biharo kaimuose ir rajonuose. Indijai pradedant leukemijos viruso eliminacijos fazę, būtina užkirsti kelią reikšmingam atsparumo vystymuisi. Būtina greitai stebėti smėlinių musių populiacijų atsparumą iš skirtingų rajonų, kvartalų ir geografinių vietovių. Šiame tyrime pateikti duomenys yra preliminarūs ir turėtų būti patikrinti palyginus su Pasaulio sveikatos organizacijos paskelbtomis identifikavimo koncentracijomis [35], kad būtų galima gauti tikslesnį vaizdą apie P. argentipes jautrumo būklę šiose vietovėse prieš modifikuojant vektorių kontrolės programas, siekiant išlaikyti mažas smėlinių musių populiacijas ir padėti eliminuoti leukemijos virusą.
Uodas P. argentipes, leukozės viruso pernešėjas, gali pradėti rodyti ankstyvus atsparumo labai veiksmingam cipermetrinui požymius. Norint išlaikyti vektorių kontrolės intervencijų epidemiologinį poveikį, būtina reguliariai stebėti insekticidų atsparumą laukinėse P. argentipes populiacijose. Siekiant valdyti atsparumą insekticidams ir paremti leukozės viruso likvidavimą Indijoje, būtina ir rekomenduojama keisti skirtingų veikimo būdų insekticidus ir (arba) vertinti bei registruoti naujus insekticidus.
Įrašo laikas: 2025 m. vasario 17 d.